钱彬彬 , 李宜奎 , 李洁 , 程丽 , 夏冰 , 汪仁 ^*

江苏省中国科学院植物研究所, 南京, 210014
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 12 篇   
收稿日期: 2017年12月27日    接受日期: 2018年04月19日    发表日期: 2018年06月22日

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利用RACE技术从忽地笑(Lycoris aurea (L’Hér.) Herb.)花葶中克隆获得细胞色素P450酶98A亚家族蛋白编码基因LaCYP98A。该基因cDNA全长1 794 bp，开放阅读框为1 518 bp，编码含有505个氨基酸残基的LaCYP98A蛋白。LaCYP98A具有细胞色素P450酶特征性的亚铁血红素结合结构域和半胱氨酸残基组成的活性中心。LaCYP98A与拟南芥、大豆等其他植物CYP98A氨基酸序列的一致性在60%以上，且具有CYP450的所有特征模序。LaCYP98A定位于植物细胞的内质网，其N-端29个氨基酸对于其亚细胞定位具有重要的作用。利用pET表达系统，通过截掉其N-端内质网定位区域，可以实现LaCYP98A在大肠杆菌中的诱导表达。本研究为LaCYP98A的功能鉴定和植物细胞色素P450的原核表达及其催化的次级代谢产物的异源合成奠定了基础。

忽地笑；CYP98A；分子克隆；亚细胞定位；原核表达